Metode Percobaan Patologi Benih

Pengamatan Visual Benih dan Blotter Test

Metode pengamatan visual benih dilakukan dengan terhadap perubahan warna, ukuran dan bentuk biji, dibandingkan dengan biji yang sehat. 
Penguian Benih Anggur dengan Blotter Test
Sumber : (http://www.winemanager.com/slarsen/Gb2010/Articles/Seed/MH/Mavo.htm)

Metode deteksi cendawan terbawa benih dilakukan pada dua lingkungan yaitu dengan suhu ruang dan suhu dingin. Metode tersebut masing-masing adalah :

Suhu ruang 
  • Dua lembar kertas hisap diletakkan ke dalam cawan petri, kemudian dilembabkan dengan cara ditetesi aquades steril. 
  • Biji diletakkan ke dalam cawan petri sebanyak 10 benih/cawan petri untuk biji kedelai dan jagung, dan 25 biji padi/cawan petri, serta 2 biji kemiri/cawan petri 
  • Cawan petri diinkubasi pada suhu ruang selama 3 hari.
  • Pengamatan dilakukan terhadap perkecambahan benih, jumlah benih yang ditumbuhi cendawan, dan jenis cendawan yang tumbuh pada biji. 
Suhu Dingin
  • Dua lembar kertas hisap diletakkan ke dalam cawan petri, kemudian dilembabkan dengan cara ditetesi aquades steril. 
  • Biji diletakkan ke dalam cawan petri sebanyak 10 benih/cawan petri untuk biji kedelai dan jagung, dan 25 biji padi/cawan petri, serta 2 biji kemiri/cawan petri. 
  • Cawan petri diinkubasi selama 1 hari pada suhu ruang, kemudian dipindahkan ke pendingin selama 1 hari, selanjutnya dipindahkan kembali ke suhu ruang selama 5 hari. 
  • Pengamatan dilakukan terhadap perkecambahan benih, jumlah benih yang ditumbuhi cendawan, dan jenis cendawan yang tumbuh pada biji.

Deteksi Patogen Terbawa Benih dengan Metode Pencucian dan Ekstraksi

Metode pencucian benih dilakukan untuk mendeteksi cendawan-cendawan yang membentuk struktur di permukaan benih. Pengujian dapat dilakukan secara cepat dan mudah, namun pengujian dengan cara ini memiliki keterbatasn karena cendawan yang berada di dalam jaringan benih tidak dapat diketahui atau terdeteksi. Hasil pengujian tersebut tidak dapat menggambarkan tingkat infeksi dan infestasi patogen pada benih.

Metode Pencucian 

Benih dimasukkan kedalam air steril/buffer dengan perbandingan benih dan air steril/buffer 1 (g) : 50 (ml) serta ditambahkan emulsifier Tween 20 di-shaker 100 rpm 1 jam. Kemudian cairannya diambil dan disentrifugasi 8000 rpm 10 menit,supernatan dibuang. Pellet di-resuspensi dan ditanama pada media agar. Pengamatan dapat dilakukan pada media agar, untuk bakteri digunakan Martin agar sedangkan untuk cendawan digunakan Natrium agar. Larutan patogen disebar pada media menggunakan glasbit. Untuk cendawan larutan patogen dapat diamati langsung pada mikroskop dengan menambahkan laktophenol. 

Metode Ekstraksi 

Tanpa Pengkayaan 
Benih padi, jagung dan kedelai sebanyak 1 gram dimasukkan ke dalam erlenmeyer berisi aquades steril sebanyak 50 ml. Erlenmeyer kemudian dishaker selama 1 jam. Air pencucian diambil sebanyak 2 ml, dimasukkan ke eppendorf, kemudian disentrifuse pada kecepatan 12.000 rpm selama 10 menit. Supernatan dibuang, pellet yang mengendap diresuspensikan dengan aquades steril sebanyak 0,3 ml, kemudian divortek. Selanjutnya suspensi diplating pada media Malting Agar (MA) sebanyak 0,1 ml setiap petridish, dan setiap perlakuan diulang dua kali. Sisa suspensi diamati di bawah mikroskop. 

Dengan Pengkayaan 
Benih padi digerus dengan mortal steril, kemudian ditambah larutan NaCl 0,85 %, dishaker pada 100 rpm selama 1 jam, dibiarkan selama 15 menit supaya larutan mengendap, kemudian diambil supernatannya sebanyak 1 ml untuk diplating pada media YDCA pada pengenceran 100, 10-1, dan 10-2, serta 1 ml diinokulasikan pada media YDCB. Supernatan pada media YDCB dishaker pada kecepatan 100 rpm selama 24 jam, kemudian diplating pada media YDCA pada pengenceran 10-2, 10-4, dan 10-6.

Komentar

Posting Komentar

Postingan populer dari blog ini

REPLIKASI, TRANSKRIPSI DAN TRANSLASI (SINTESIS PROTEIN)

Gambar
Pengertian DNA DNA, Deoxyribose Nucleic Acid adalah asam nukleotida, biasanya dalam bentuk heliks ganda yang mengandung instruksi genetik yang menentukan perkembangan biologis dari seluruh bentuk kehidupan sel. DNA berbentuk polimer panjang nukleotida, mengkode barisan residu asam amino dalam protein dengan menggunakan kode genetik, sebuah kode nukleotida triplet.  DNA seringkali dirujuk sebagai molekul hereditas karena ia bertanggung jawab untuk penurunan sifat genetika dari kebanyakan ciri yang diwariskan. Pada manusia, ciri-ciri ini misalnya dari warna rambut hingga kerentanan terhadap penyakit. Selama pembelahan sel, DNA direplikasi dan dapat diteruskan ke keturunan selama reproduksi.  DNA bukanlah suatu molekul tunggal, nampaknya ia adalah sepasang molekul yang digandeng oleh ikatan hidrogen: DNA tersusun sebagai untai komplementer dengan ikatan hidrogen di antara mereka. Masing-masing untai DNA adalah rantai kimia ?batu bata penyusun, yakni nukleotida, yang terdiri
Baca selengkapnya

METODE SELEKSI PADA TANAMAN MENYERBUK SENDIRI DALAM PEMULIAAN TANAMAN

Gambar
Penggabungan gen-gen yang terdapat pada kedua tetua merupakan tujuan persilangan pada tanaman mnyerbuk silang. Sebelum menetapkan metose apa yang akan dilaksanakan untuk menangani generasi-generasi yang bersegregasi, agar program pemuliaan yng telah ditentukan dapat berhasil dengan baik. Sehingga, para pemulia harus mmperhatikan beberapa hal, diantaranya: Informasi daya hasil, Daya adaptasi dan ketahanan tetua terhadap hama, penyakit dan berbagai cekaman lainnya, Cara pewarisan sifat yang diperbaiki, Pertimbangan teknis, seperti mudah tidaknya membuat hibrida atau berapa luas lahan yang diperlukan dalam pengujian generasi yang bersegregasi tersebut, Pemilihan tetua, dan Cara seleksinya.  Semua faktor diatas merupakan hal-hal yang mempengaruhi pengambilan keputusan dalam penentuan metode seleksi. Di dalam pemuliaan tanaman ada beberapa metode seleksi yang dapat dilakukan pada tanaman menyerbuk sendiri yaitu seleksi silsilah (pedigree). Seleksi Silsilah (Pedigree)  M
Baca selengkapnya

Centotheca lappacea (Linnaeus) Desvaux

Gambar
Famili : Gramineae (Poaceae) Jenis : Rumput Nama lokal : Suket lorodan / Jukut Kidang Sumber foto : http://plantjdx.com/centotheca_lappacea.htm Morfologi :  Daun : berbentuk bulat telur atau bulat panjang, pangkal tidak simetris, ujungnya runcing, tepi daun berombak dan bewarna keunguan. Lidah daun : lebar membran berukuran 2-3 mm. Susunan buliran : buliran panjang tangkai 1-5 mm tersusun agak longgar dan merapat ke sumbu. Buliran : warna hijau kemerahan, terdapat 1-3 floret (5-8 mm), ujungnya runcing dan sekam kelopak tumpul.  Batang : tegak membentuk rumpun yang kokoh, bentuknya bulat atau agak pipih, tidak berongga, tidak ditumbuhi bulu, panjang berkisar 25-125 cm (biasanya ± 50 cm), bukunya berwarna ungu dan tidak berbulu.  Pembungaan : terdapat malai pada ujung batang dengan tinggi 5-40 cm, cabang primer tumbuh satu-satu atau tergabung 2-3 dari satu titik, tersebar, bercabang pendek dan buliran agak longgar.  Perbanyakan :  Secara generatif menggunakan biji k
Baca selengkapnya